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OBJETIVO: Uveíte é a maior causa de doença ocular que afeta o trato uveal, e ocasionalmente a esclera, cornea e o nervo óptico. Esta doença é a maior causa de morbidade ocular e cegueira em pacientes imunocompetentes e imunossuprimidos. Neste trabalho nós analisamos a sensiblidade e especificidade do PCR em tempo real para detectar agentes etiológicos no sangue, plasma, humor vítreo e aquoso, e comparamos com a hipótese diagnóstica. MÉTODOS: Vinte e sete pacientes (13 homens) foram estudados e o método de PCR em tempo real foi usado para detectar o vírus da herpes simples 1 (HSV-1), vírus da herpes simples 2 (HSV-2), vírus varicella zoster (VZV), citomegalovírus (CMV), Mycobacterium tuberculosis (TB) e Toxoplama gondii (Toxo) no humor aquoso e vítreo, além do sangue e plasma. RESULTADOS: Nossos resultados mostraram a presença de Toxo, CMV, VZV ou HSV-2 em 19,2% das amostras de humor aquoso, e em 30% das amostras de humor vítreo. Nas amostras de plasma e sangue somente CMV foi detectado (11,1% e 3,7%, respectivamente). CONCLUSÃO: PCR em tempo real foi capaz de detectar e confirmar a hipótese diagnóstica em uveíte. Nossos dados confirmam que o humor vítreo é a melhor fonte para diagnóstico molecular de uveíte infecciosa, porém o humor aquoso também foi uma fonte importante de detecção, além de ser mais fácil de se obter.

Keywords: Reação em cadeia da polimerase; Uveíte; Uveíte; Uveíte; Infecções oculares virais; Humor aquoso; Corpo vítreo

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Objetivo: Analisar o uso do PCR em tempo real (qPCR) na detecção do DNA do T. gondii no sangue periférico e no humor aquoso de pacientes com lesões de retinocoroidite focal, ativa por toxoplasmose. Métodos: Cinquenta e cinco pacientes com uveite infecciosa foram incluídos neste estudo. Os pacientes foram atendidos entre 2009 a 2013, no Departamento de Oftalmologia e Ciências Visuais da Universidade Federal de São Paulo. Quarenta e três pacientes tiveram o diagnóstico de lesões de retinocoroidite focal, ativa por toxoplasmose e, os outros 12 tiveram o diagnóstico de uveíte infecciosa não toxoplásmica e, por isso foram usados como grupo controle. A técnica de qPCR foi utilizada na detecção de DNA do T. gondii em amostras de sangue periférico e humor aquoso. Resultados: O qPCR foi positivo para o DNA do T. gondii em 37,21% (16/43) das amostras de humor aquoso, 2,33% (1/43) nas amostras de sangue periférico e, 16,27% (7/43) em ambas amostras simultaneamente. Conclusão: O qPCR foi capaz de detectar o DNA do T. gondii em pacientes com lesões de retinocoroidite focal, ativa por Toxoplasmose, no sangue bem como, no humor aquoso, podendo ajudar no diagnostico.

Keywords: Toxoplasmose ocular/diagnóstico; Toxoplasma; Sangue/parasitologia; Coriodite; Reação em cadeia da polimerase em tempo real; Humor aquoso

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PURPOSE: To characterize the extracellular vesicle protein cargo in the aqueous humor and plasma of patients with ocular toxoplasmosis.
METHODS: Aqueous humor and plasma were collected from six patients with active ocular toxoplasmosis and six patients with cataract. Extracellular vesicles were isolated, and western blotting and mass spectrometry were performed for protein analysis.
RESULTS: All plasma samples from patients with ocular toxoplasmosis and cataract were positive for the tetraspanins CD63 and TSG101. However, the aqueous humor from patients with ocular toxoplasmosis was positive only for CD63. Sixty-seven new unreported proteins were identified in the aqueous humor and plasma of patients with the ocular toxoplasmosis and cataract. Of the 67 proteins, 10 and 7 were found only in the cataract and ocular toxoplasmosis groups, respectively. In general, these proteins were involved in immune system activation and retina homeostasis and were related to infections and retina-associated diseases. Conclusion: The distinct protein signatures between ocular toxoplasmosis and cataract may be helpful in the differential diagnosis of ocular toxoplasmosis. However, more studies are needed to better understand the role of these proteins in the pathogenesis of ocular toxoplasmosis.

Keywords: Extracellular vesicles; Proteomics; Toxoplasma gondii; Ocular toxoplasmosis, Aqueous humor; Plasma; Liquid biopsy