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Search for: Cytological Techniques; Cornea; Conjunctiva; Cytodiagnosis; Staining and labeling
Abstract
Objetivo: O objetivo deste estudo é comparar as medições de diâmetro corneano de dois dispositivos normalmente utilizados na prática clínica (IOL Master 500 e Atlas topógrafo corneal) para ver se são permutáveis. O fornecimento de informações sobre a permutabilidade de instrumentos poderia eliminar vários testes desnecessários e, consequentemente, reduzir a carga econômica para o paciente e para a sociedade.
Métodos: Nesta série de casos prospectivos e comparativos, a distância do diâmetro corneano foi medida por examinadores independentes utilizando o Topógrafo Atlas (Carl Zeiss Meditec) e o IOL Master 500 (Carl Zeiss Meditec), em um olho de 184 pacientes. A análise estatística foi realizada utilizando o teste t pareado, a correlação Pearson e a análise Bland-Altman para comparar os métodos de medição.
Resultados: As medições médias da distância do diâmetro corneano com o topógrafo Atlas e o IOL Master 500 foram de 12,20 ± 0,44 mm e 12,12 ± 0,41 mm, respectivamente (p<0,001). A diferença média de WTW entre os dois dispositivos foi de 0,07 mm (intervalo de confiança de 95% da diferença média: 0,04 - 0,11 mm). O coeficiente de correlação Pearson entre os dois dispositivos foi de 0,85, p<0,0001. Os limites de concordância de 95% entre os dois dispositivos foram de -0,38 mm a 0,53 mm.
Conclusões: O Atlas topographer e o IOL Master 500 podem ser utilizados permutavelmente em relação à medição do diâmetro corneano, uma vez que a gama de diferenças encontradas é pouco susceptível de afetar a prática clínica e a tomada de decisões.
Keywords: Topografia da córnea; Comprimento axial do olho; Técnicas de diagnóstico oftalmológico; Procedimentos cirúrgicos oftalmológicos.
Abstract
OBJETIVO: Analisar o perfil e a taxa de publicação em periódicos indexados de resumos apresentados na seção de córnea da reunião anual da Association for Research in Vision and Ophthalmology - ARVO, para identificar potenciais fatores preditivos com objetivo de obter melhores resultados.
MÉTODOS: Artigos que foram aceitos para apresentação no encontro anual da Association for Research in Vision and Ophthalmology - ARVO 2013 na seção de córnea foram pesquisados via PubMed e Scopus para identificar se haviam sido publicados como manuscritos com texto integral. Nome do primeiro autor, data de publicação, nome da revista e fator de impacto foram registrados. Foi feita uma regressão multivariada para estabelecer uma associação entre as variáveis e a chance de publicação e o fator de impacto da revista. Foi utilizado o método Kaplan-Meier para analisar o tempo da apresentação até a publicação dos artigos.
RESULTADOS: Dos 939 artigos analisados, 360 (38.3%) foram publicados em revistas com um fator de impacto médio de 3.4. O intervalo de tempo entre a submissão do resumo e a publicação do artigo teve como mediana 22 meses. Na análise multivariada, resumos tinham mais chance de publicação se tinham algum tipo de financiamento (OR=1.482, p=0.005), tinham grupo controle (OR=1.511, p=0.016) e estavam no âmbito da pesquisa científica básica (OR+1.388, p=0.020). O fator de impacto da revista era maior em estudos financiados (β=0.163, p=0.002) e mais baixo naqueles multicêntricos (β=-0.170, p=0.001). A análise Kaplan-Meier mostrou diferenças significativas na distribuição de tempo até a publicação de resumos de ciência básica vs clínicos (χ2=7.636), com grupo controle vs sem grupo controle (χ2=6.921) e financiados vs não financiados (χ2=13.892) (p<0.05).
CONCLUSÃO: Aproximadamente 40% dos resumos apresentados no encontro da Association for Research in Vision and Ophthalmology - ARVO foram publicados dentro de 5 anos da submissão. Financiamento, pesquisa no âmbito da ciência básica e presença de grupo controle foram fatores determinantes para melhores resultados em relação à chance de publicação.
Keywords: Resumos e indexação como assunto; Bibliometria; Congressos como assunto; Resumo de reunião; Publicações/estatística & dados numéricos; Córnea
Abstract
Objetivo: Investigar a superfície ocular e as glândulas meibomianas em pacientes com acne vulgar não tratada.
Métodos: Todos os indivíduos responderam ao questionário Ocular Surface Disease Index (OSDI) e tiveram avaliados o tempo de ruptura do filme lacrimal pelo método invasivo, a coloração da superfície ocular com fluoresceína e o teste de Schirmer II. Foram ainda avaliados o escore palpebral total e o de secreção das glândulas meibomianas. Foi realizada meibografia sem contato com um dispositivo topográfico corneano Sirius.
Resultados: Foram incluídos no estudo os olhos direitos de 35 voluntários com acne vulgar e 35 saudáveis. Os escores do Ocular Surface Disease Index e da coloração foram significativamente maiores no grupo com acne em comparação com o grupo controle (p=0,01 e p=0,003, respectivamente), mas o tempo de ruptura do filme lacrimal pelo método invasivo e as medidas do teste de Schirmer II foram significativamente menores (p=0,000 e p=0,003, respectivamente). O escore palpebral total e o escore de secreção das glândulas meibomianas também foram maiores no grupo com acne que no grupo controle (p=0,003 e p=0,000). Na avaliação morfológica das glândulas meibomianas, o espessamento, o afinamento, a tortuosidade e a presença de áreas fantasmas nas glândulas foram mais comuns no grupo acne vulgar que no grupo controle, com significância estatística (p=0,000, p=0,001, p=0,05 e p=0,006 respectivamente). A porcentagem da área de perdas das glândulas meibomianas foi significativamente mais alta no grupo com acne vulgar, tanto na meibografia superior quanto na inferior. A área de perda das glândulas meibomianas demonstrou uma correlação positiva com o escore palpebral total e com o escore de secreção das glândulas meibomianas.
Conclusão: A acne vulgar pode levar a uma predisposição para a disfunção das glândulas meibomianas e para danos na superfície ocular. Parece ser importante reconhecer precocemente as alterações das glândulas meibomianas e da superfície ocular, especialmente nos casos de acne vulgar para os quais se planeja o tratamento oral com isotretinoína.
Keywords: Acne vulgar/complicação; Acne vulgaris/tratamento farmacológico; Isotretinoína/uso terapêutico; Pálpebra; Túnica conjuntiva/patologia; Síndrome do olho seco; Glândula tarsal; Técnica de diagnóstico oftalmológico; Questionário
Abstract
Objetivo: Avaliar as alterações da superfície ocular em pacientes com Rosácea, e comparar com grupo controle.
Métodos: Noventa e três indivíduos foram selecionados para este estudo transversal, observacional e não intervencionista, dividido em dois grupos: rosácea (n=40) e controles (n=53). Foram avaliados parâmetros objetivos da superfície ocular (hiperemia conjuntival, estabilidade e volume do filme lacrimal, disfunção da glândula meibomiana, doença do olho seco, coloração da superfície ocular) e comparado indivíduos saudáveis com pacientes com rosácea.
Resultados: 69,23% dos indivíduos com rosácea eram mulheres, com média de idade de 47,34 ± 12,62 anos. Em comparação com controles pareados, não foram evidenciadas diferenças estatisticamente significativas em relação à acuidade visual (p=0,987) e parâmetros do filme lacrimal (altura do menisco lacrimal (p=0,338), tempo de ruptura do filme lacrimal não invasivo (p=0,228), tempo invasivo de ruptura (p=0,471) e teste de Schirmer (p=0,244), bem como hiperemia conjuntival (p=0,106) e coloração com fluoresceína (p=0,489). Associação significativa foi encontrada na avaliação da meibografia (p=0,026), integridade da camada mucosa (p=0,015) e sintomas de superfície ocular (p<0,0001). Pacientes com rosácea também apresentaram alterações importantes na borda palpebral: expressibilidade glandular (p<0,001), padrão de secreção glandular (p<0,001) e telangiectasia (p<0,001).
Conclusão: A disfunção da glândula de Meibômio está frequentemente associada a condições dermatológicas e é caracterizada por achados morfológicos na meibografia, bem como comprometimento da secreção lipídica que leva ao olho seco evaporativo e alterações da superfície ocular e inflamação.
Keywords: Rosácea/complicações; Disfunção da glândula tarsal; Túnica conjuntiva; Síndromes do olho seco; Técnicas de diagnóstico oftalmológico.
Abstract
PURPOSE: Access to cataract treatment and diagnostic tools continues to be hindered by financial and logistical barriers. Thus, photography-based cataract analysis via portable devices offers a promising solution for the detection of cataracts in remote regions. In this study, the accuracy of a portable device that is based on the Lens Opacities Classification III System for diagnosing cataracts was analyzed.
METHODS: Photographs of the anterior segment of the eye were taken in a low-light environment, and the pupillary region markings were automatically delineated using infrared photography. The captured images were automatically analyzed using a convolutional neural network. The study group included patients with cataracts, and the control group included patients without cataracts.
RESULTS:A total of 270 eyes were analyzed, which included 143 eyes with cataracts and 127 control eyes. A total of 599 photos were analyzed. The isolated nuclear cataract was the most frequently detected subtype (37.5%), followed by a nuclear cataract associated with a cortical cataract (30.3%). The device's accuracy was 88.5% (Confidence intervals (CI), 83.19%–94.69%), specificity was 84.62% (CI 71.79%–97.30%), positive predictive value was 91.78% (CI 74.36%–97.30%), and negative predictive value was 82.50% (CI 74.36%–97.30%).
CONCLUSION: The portable device is a simplified user-friendly cataract screening technique that can interpret results in remote regions. This innovation could mitigate the occurrence of cataract-induced blindness and prevent premature surgical interventions in early-stage cataracts.
Keywords: Cataract/diagnosis; Diagnostic techniques ophthalmological/instrumentation; Optical devices; Equipment and supplies; Eye-tracking technology
Abstract
PURPOSE: This study aimed to evaluate the relationship between the objective severity of dry eye disease subjective symptoms, and corneal sensitivity.
METHODS: The study included 62 eyes from 31 healthy volunteers and 150 eyes from 75 patients diagnosed with dry eye disease . Participants underwent the Schirmer I test, tear break-up time assessment, and corneal staining evaluation using the Oxford Scale. Subjective symptoms were assessed through the Ocular Surface Disease Index questionnaire and a modified Ocular Surface Pain Score questionnaire. Corneal sensitivity was measured in five corneal regions using a Cochet-Bonnet esthesiometer. Dry eye disease severity was graded from 1 to 5 based on the Oxford Scale. Comparative analyses were performed.
RESULTS: Schirmer I and tear break-up time values were significantly lower in the DED group, while Ocular Surface Disease Index and Ocular Surface Pain Score were significantly higher (p<0.001 for all). Corneal sensitivity in all quadrants was significantly lower in DED patients (p<0.001 for all). A strong correlation was observed between the Ocular Surface Pain Score and the Ocular Surface Disease Index (r=0.983, p<0.001). Central corneal sensitivity exhibited a moderate positive correlation with Schirmer I and tear break-up time (p<0.001, r=0.583 and 0.657, respectively) and a moderate negative correlation with Ocular Surface Disease Index and Ocular Surface Pain Score (p<0.001, r=0.625 and −0.631, respectively). Disease severity progression was associated with increased Ocular Surface Disease Index and Ocular Surface Pain Score, but no statistically significant difference was found between Grades 3 and 5. Similarly, corneal sensitivity decreased with advancing disease severity, yet no significant difference was observed between Grades 4 and 5.
CONCLUSION: Corneal sensitivity decreases in dry eye disease and is negatively correlated with disease severity. Subjective symptoms increase with disease progression and show a positive correlation with severity. The absence of significant differences between the advanced stages suggests that neuropathic mechanisms and subbasal nerve plexus deterioration play a role in chronic and late-stage dry eye disease.
Keywords: dry eye disease; signs and symptoms; cornea; neuralgia; Cochet-Bonnet esthesiometer; sensory thresholds; surveys and questionnaires
Abstract
OJETIVOS: O olho seco é uma doença multifatorial, muito comum na prática clínica oftalmológica. A utilização de questionários validados de sintomas de olho seco permite rastrear de maneira mais objetiva essa doença na população geral, avaliar a prevalência dos sintomas e frequência de diagnóstico, permitindo o tratamento precoce e adequado dessa condição. O 5-Item Dry Eye Questionnaire (DEQ-5) é um questionário em inglês que avalia a frequência e a intensidade do desconforto e ressecamento ocular e a frequência do lacrimejamento, já validado no inglês e espanhol, porém não no português até o presente momento. O objetivo deste estudo foi traduzir e validar o questionário DEQ-5 para a língua portuguesa.
MÉTODOS: Foi utilizado o questionário DEQ-5, composto por 5 perguntas simples e diretas - 2 relacionadas ao desconforto ocular, 2 ao ressecamento ocular e 1 ao lacrimejamento. Foi realizada a tradução inicial da versão em inglês para o português por dois tradutores de língua materna portuguesa, seguido de uma avaliação e compilação de uma versão única por um comitê interdisciplinar das versões traduzidas. Em seguida, tal versão foi traduzida de volta para o inglês por 2 indivíduos que possuíam o inglês como primeira língua, seguido de avaliação e comparação com a versão original em língua inglesa pelo mesmo comitê interdisciplinar. Após, a versão final do questionário foi aplicada em 31 voluntários em dois momentos diferentes.
RESULTADOS: A confiabilidade interobservador das 5 perguntas variou de 0,584-0,813 e a correlação de Pearson de 0.755-0.935, sendo o p-valor <0,0001 em todas elas. A consistência interna foi α=0,887. Todas as perguntas apresentaram concordância de moderada a alta.
CONCLUSÕES: A análise estatística dos dados coletados encontrou ótimos índices de concordância - moderada a alta para todas as questões analisadas -, permitindo o uso do DEQ-5 na língua portuguesa em pesquisas e também como forma de triagem para doença de olho seco e acompanhamento dos sintomas.
Keywords: Síndromes do olho seco; Técnicas de diagnóstico oftalmológico; Inquéritos e questionários; Traduções
Abstract
PURPOSE: This study aimed to evaluate the influence of intrastromal corneal ring segment implants on the intraocular pressure measurements using Goldmann applanation tonometry, rebound tonometry, and noncontact tonometry in keratoconic corneas and analyze the intertonometer agreement.
METHODS: We enrolled 74 eyes in this observational and prospective study. Each participant had a complete eye examination, corneal analysis with Scheimpflug Tomography (Pentacam®), and intraocular pressure evaluation with Goldmann applanation tonometry, rebound tonometry, and noncontact tonometry, before and after intrastromal corneal ring segment implantation (on postoperative days 1, 7, 45, and 90). Intertonometer agreement was assessed using Bland-Altman analysis.
RESULTS: The mean age was 29.9 ± 10.2 years, and 47 (63.5%) eyes had keratoconus grade II. Intraocular pressures were higher for noncontact tonometry preoperatively and on 90 postoperative day (mean ± SD: 12.4 ± and 12.1 ± 2.2 mmHg, respectively), followed by Goldmann applanation tonometry (11.1 ± 3.0 and 11.2 ± 2.7 mmHg, respectively), and were lower for rebound tonometry (9.7 ± and 9.4 ± 3.2 mmHg, respectively). The variation from the Goldmann tonometry on 7 postoperative day to the baseline (p=0.022) and that of noncontact tonometry on 90 postoperative day to the baseline (p=0.021) were statistically significant. The rebound tonometry underestimated intraocular pressure when compared with the Goldmann applanation tonometry by a mean of 1.47 ± 5.19 mmHg. Noncontact tonometry, when compared with Goldmann applanation tonometry, overesti-mated intraocular pressure by a mean of 1.23 ± 4.15 mmHg.
CONCLUSION: Despite statistically significant differences between some postoperative periods, the intraocular pressure measurement differences may not be clinically relevant.
Keywords: Keratoconus; Intraocular pressure; Cornea; Corneal stroma; Postoperative period; Tonometry ocular; Prostheses and implants
Abstract
Objetivo: Comparar as diferenças entre a chord aparente µ e o chord real µ.
Métodos: Estudo prospectivo, comparativo, não randomizado e não intervencionista. Os exames de imagem (Pentacam e HD Analyzer) foram realizados na mesma sala e nas mesmas condições escotópicas. Os critérios de inclusão foram idade de 21 a 71 anos; compreensão do termo de consentimento; miopia até 4D e astigmatismo topográfico anterior até 1D. Os critérios de exclusão foram usuários de lentes de contato; pacientes com doenças oculares prévias ou cirurgias; opacidades da córnea; a presença de alterações tomográficas da córnea ou suspeita de ceratocone.
Resultados: Em nosso estudo foram analisados 116 olhos de 58 pacientes. A média de idade foi de 30,69 anos (± 7,85). Análises de correlação foram desenvolvidas e o coeficiente de correlação de Pearson (0,647) indica uma relação linear positiva moderada entre as variáveis. A média do chord µ real foi 226,21± 128,53 µm e a média do chord µ média foi 278,66 ± 123,90 µm, com diferença média de 52,45 µm (p=0,01).
A análise do diâmetro pupilar médio apresentou: 5,76mm no HD Analyzer e 3,31mm no Pentacam.
Conclusões: Entendemos a existência de uma diferença significativa entre os métodos e assim a medida de ambos os dispositivos com base em princípios diferentes devemos respeitar suas peculiaridades. Como encontramos correlação entre as duas medidas, acreditamos que ambas podem ser utilizadas na prática diária.
Keywords: Imagem óptica; Percepção visual; Pupila; Segmento anterior do olho; Córnea; Técnicas de diagnóstico oftalmológico
Abstract
Objetivo: Relatar um experimento projetado para determinar alterações anatômicas em córneas porcinas após a colocação de um novo implante depolímero na córnea.
Métodos: Foi utilizado olho de porco ex vivo. Um novo agente modelador biocompatível, de colágeno tipo 1, com 6mm de diâmetro foi moldado com excimer laser em sua face posterior, para criar três formatos planocôncavos. Os implantes foram inseridos dentro de um bolsão, dissecado manualmente, a 200 micrômetros (µm). Foram definidos três grupos de tratamento: grupo A (n=3), teve a profundidade máxima de ablação de70 µm; o grupo B (n=3), profundidade máxima de ablação de 64 µm; e o grupo C (n=3), profundidade máxima de ablação de 104 µm, com buraco central. O grupo controle, D (n=3), foi incluído, com a criação do bolsão estromal, porém sem inserir o material. A avaliação desses olhos foi realizada por tomografia de coerência óptica (OCT) e por tomografia corneana.
Resultados: A tomografia corneana mostrou uma tendência para diminuição da ceratometria média em todos os 4 grupos. A tomografia de coerência óptica mostrou córneas com implantes localizados no estroma anterior e aplanamento visível, enquanto as córneas não mudaram qualitativamente o formato no grupo controle.
Conclusões: O novo implante de biomaterial planocôncavo descrito aqui foi capaz de remodelar a córnea em modelo de animal ex vivo, resultando no aplanamento corneano. Novos estudos são necessários usando modelos animais in vivo para confirmar tais achados.
Keywords: Córnea; Cirurgia da córnea a laser; Substância própria; Proteses e implantes; Lasers de excimer; Materiais biocompatíveis; Animais; Suínos
Abstract
PURPOSE: To evaluate the effect of upper eyelid ptosis repair with Muller muscle-conjunctival resection on meibomian gland function and ocular surface parameters.
METHODS: Thirty-eight patients who underwent ptosis repair with Muller muscle-conjunctival resection were retrospectively reviewed. Meibomian gland loss, Ocular Surface Disease Index OXFORD score, meiboscore, and noninvasive keratograph break-up time were measured preoperatively and at 1st, 3rd, and 6th months postoperatively.
RESULTS: Noninvasive keratograph break-up time values decreased significantly at 1st and 3rd months postoperatively compared to the preoperative level, but were similar to the preoperative level at 6th months postoperatively (p<0.001 and p=0.628, respectively). Ocular surface disease index, OXFORD score, meibomian gland loss, and meiboscore values increased significantly in the 1st and 3rd postoperative months compared to the preoperative period, but these values decreased to preoperative levels in the 6th postoperative month (p<0.001 and p>0.05, respectively).
CONCLUSION: There is a transient deterioration in meibography findings and OSDI score in the early postoperative period after Muller muscle-conjunctival resection. Patients undergoing Muller muscle-conjunctival resection may require topical lubricants, especially in the first 3 postoperative months.
Keywords: Meibomian glands; Blepharoptosis; Preoperative period; Conjunctiva; Muscles; Eyelid diseases; Diagnostic techniques, ophthalmological
Abstract
PURPOSE: To quantitatively assess changes in central corneal sensitivity after phacoemulsification and to characterize recovery patterns up to 90 days using standardized esthesiometry.
METHODS: This prospective observational study included 44 patients (88 eyes) undergoing uncomplicated phacoemulsification with intraocular lens implantation. Central corneal sensitivity was measured using a Cochet-Bonnet® esthesiometer preoperatively and at 30 and 90 days postoperatively. Repeated-measures data were analyzed using Friedman and Wilcoxon signed-rank tests (p<0.05). Inter-eye differences were assessed with a paired Wilcoxon test. Individual changes from baseline (Δ30, Δ90) were calculated, and 90-day recovery was categorized according to thresholds aligned with the 5-mm device resolution. Spearman correlation was used to explore associations between age and Δ90.
RESULTS: Corneal sensitivity decreased after surgery. In right eyes, mean sensitivity declined from 41.14 ± 7.77 mm at baseline to 36.82 ± 9.03 mm at 30 days and partially recovered to 38.64 ± 7.73 mm at 90 days. In left eyes, sensitivity decreased from 44.11 ± 6.29 mm to 37.39 ± 9.05 mm at 30 days and recovered to 41.82 ± 7.63 mm at 90 days. Left eyes showed higher sensitivity than right eyes at baseline (p=0.023) and at 90 days (p=0.018). At 90 days, complete or near-complete recovery (within ± 5 mm of baseline) occurred in 73.2% of right eyes and 78.0% of left eyes, while improvement above baseline (≥ +5 mm) occurred in 7.3% and 4.9%, respectively. Age showed weak, nonsignificant correlations with Δ90 (p=−0.14 to −0.19; p>0.2).
CONCLUSION: Phacoemulsification with a 2.75-mm clear corneal incision leads to a temporary reduction in central corneal sensitivity, with partial recovery by 90 days. Recovery patterns vary among individuals, highlighting the value of postoperative sensitivity monitoring to identify atypical trajectories and guide ocular surface care during visual rehabilitation.
Keywords: Phacoemulsification; Cornea/innervation; Ophthalmic nerve/physiology; Optometry/instrumentation; Diagnostic techniques, ophthalmological; Neural regeneration; Visual rehabilitation.
Abstract
PURPOSE: To describe cellular alterations detected by impression cytology of the ocular surface in patients with xeroderma pigmentosum. The secondary objective was to assess the reliability of impression cytology in diagnosing ocular surface squamous neoplasia.
METHODS: Patients with xeroderma pigmentosum underwent a single-day complete ophthalmological examination and impression cytology for ocular surface evaluation using 13 mm diameter mixed cellulose esters membrane filters and combined staining with Periodic Acid Schiff, Hematoxylin and Eosin, and Papanicolaou stains followed by microscopic analysis. The cytological findings were correlated with the clinical diagnosis. The impression cytology findings at baseline and one-year follow-up were correlated with the clinical course (no tumor, treated tumor, residual tumor recurrent tumor, new tumor).
RESULTS: Of the 42 patients examined, impression cytology was performed in 62 eyes of 34 participants (65% females). The mean age of patients was 29.6 ± 17 years (range 7-62). Fifteen eyes had a clinical diagnosis of ocular surface squamous neoplasia. Impression cytology showed goblet cells (47, 75%), inflammatory cells (12, 19%), keratinization (5, 8%), and squamous metaplasia (30, 48%). Impression cytology was positive for atypical cells in 18 patients (12 with and 6 without ocular surface squamous neoplasia). The sensitivity, specificity, positive predictive value, and negative predictive value of impression cytology (at baseline) for diagnosis of ocular surface squamous neoplasia were 80%, 87%, 67%, and 93%, respectively, using clinical diagnosis of ocular surface squamous neoplasia as the reference standard.
CONCLUSION: Impression cytology has a moderate positive predictive value for the diagnosis of ocular surface squamous neoplasia in patients with xeroderma pigmentosum. However, the lack of detection of atypical cells on impression cytology has a high negative predictive value for ocular surface squamous neoplasia. Integration of impression cytology in the long-term management of high-risk patients, such as patients with xeroderma pigmentosum, can avoid unnecessary diagnostic biopsies.
Keywords: Xeroderma pigmentosum; Eye neoplasms; Conjunctiva/cytology; Cornea/cytology; Cytological techniques
Abstract
OBJETIVOS: Foram estudadas cinco técnicas de cultivo primário de células epiteliais de córnea humana para se determinar o melhor protocolo para a obtenção do maior rendimento de meio de cultivo condicionado para ser utilizado na diferenciação de células tronco mesenquimais para células epiteliais de córnea.
MÉTODOS: As técnicas de cultivo estudadas foram: explantes em frascos de cultivo com e sem tratamento hidrofílico de superfície, sobre membrana amniótica, com digestão enzimática e por raspado de córnea. O meio de cultivo condicionado foi coletado e as células tronco mesenquimais induzidas a se diferenciarem em células epiteliais da córnea utilizando o meio de cultivo condicionado. As células foram caracterizadas por citometria de fluxo com pan-citoqueratina e com os marcadores específicos da córnea, citoqueratina 3 e citoqueratina 12.
RESULTADOS: A técnica utilizando frascos com o tratamento de superfície apresentou o maior rendimento de meio de cultivo condicionado. Os frascos sem tratamento de superfície levaram a uma taxa de sucesso muito baixa. A digestão enzimática e a raspagem da córnea mostraram contaminação das culturas com fibroblastos de córnea. A cultura sobre membranas amnióticas só permitiu a coleta do meio de cultivo condicionado durante a 1ª confluência celular. A análise de citometria de fluxo confirmou o sucesso da diferenciação celular utilizando o meio de cultivo condicionado coletado, demonstrada pela expressão de citoqueratina 3 (95,3%), citoqueratina 12 (93,4%) e pan-citoqueratina (95,3%).
CONCLUSÃO: O cultivo de explantes de células tronco mesenquimais em frascos com tratamento hidrofílico de superfície é a melhor técnica para a obtenção de um alto rendimento de meio de cultivo condicionado.
Keywords: Cultivo de células; Células tronco mesenquimais; Diferenciação celular; Células epiteliais; Córnea; Meio de cultivo condicionado; Técnicas de cultivo
Abstract
Um homem de 60 anos, diagnosticado com mieloma múltiplo recidivante refratário, apresentou vermelhidão, dor, sensação de corpo estranho e visão turva em ambos os olhos, aumentando gradualmente após sua terceira infusão de belantamabe mafodotina. À biomicroscopia, foram observadas alterações epiteliais bilaterais semelhantes a microcistos e depósitos epiteliais semelhantes a cristais. A microscopia confocal in vivo revelou depósitos hiper-refletivos intraepiteliais e subepiteliais na córnea. Devido à toxicidade corneana, a terapia com belantamabe mafodotina foi interrompida por sete semanas e a toxicidade foi gradualmente resolvida. Nosso objetivo é demonstrar os achados à biomicroscopia confocal in vivo e à lâmpada de fenda da toxicidade corneana relacionada ao belantamabe mafodotina.
Keywords: Mieloma múltiplo; Belantamabe mafodotina; Microscopia confocal; Córnea; Efeitos colaterais e reações adversas relacionados a medicamentos
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